1.直接檢查
栝樓種子隨機(jī)取500粒,將樣品放在白紙上,觀察整齊度、色澤、蟲叮、病斑等外觀現(xiàn)象。
2.種子外部檢查
(1)吸水紙法:
在培養(yǎng)皿中放3層吸水紙,用無菌水濕潤(rùn),瀝去多余水分,把5粒種子播在紙上,蓋好培養(yǎng)皿,重復(fù)10次,在20℃吸漲1d后,在28℃恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng),經(jīng)過3~5d培養(yǎng)后,檢查種子外部是否存在病原菌。
(2)洗滌法:
將100粒種子在無菌水中浸泡30min,用力振蕩,將洗滌液稀釋100倍,分別在營(yíng)養(yǎng)瓊脂和虎紅培養(yǎng)基涂皿,細(xì)菌和真菌分別在37℃、28℃恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng),檢測(cè)種子外表攜帶的細(xì)菌和真菌,并進(jìn)一步鑒定特定菌。
3.種子內(nèi)部檢查
將100粒種子在1%次氯酸鈉溶液中消毒30min,再用無菌水洗滌3次后浸泡2h,剖開后分別接種在營(yíng)養(yǎng)瓊脂和虎紅培養(yǎng)基上,細(xì)菌和真菌分別在37℃、28℃培養(yǎng)箱培養(yǎng),經(jīng)過3~7d培養(yǎng)后,檢查種子內(nèi)部是否存在病原菌,并進(jìn)一步鑒定特定菌。
試驗(yàn)結(jié)果表明,5份種子均不含致病菌,所攜帶一定量的真菌和細(xì)菌對(duì)種子發(fā)芽以及苗期生長(zhǎng)基本無不良影響。